Nauka innov. 2015, 11(5):67-75 
https://doi.org/10.15407/scin11.05.067

М.Т. Юрків¹, О.О. Куриленко¹, Р.В. Василишин¹, К.В. Дмитрук¹, Н.Б. Мартинюк², В.В. Скороход², А.А. Сибірний^1
1Інститут біології клітини НАН України, Львів
²Приватне акціонерне товариство «Ензим», Ладижин

Розробка технології отримання препаратів глутатіону на основі сконструйованих активних суперпродуцентівцього трипептиду у дріжджів

Розділ: Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України
Мова статті: українська
Анотація: За допомогою метаболічної інженерії сконструйовано штам метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha з посиленою експресією генів GSH2, що кодує γ-глутамілцистеїнілсинтетазу, та MET4, що кодує транскрипційний активатор генів біосинтезу цистеїну (попередник синтезу глутатіону). Отриманий рекомбінантний штам характеризується підвищеною продуктивністю синтезу глутатіону порівняно із штамом дикого типу в лабораторних умовах. Було проведено оптимізацію синтезу глутатіону сконструйованого рекомбінантного штаму H. polymorpha. Розроблено напівпромислову модель технології отримання глутатіону з використанням сконструйованого дріжджового штаму-продуцента.
Ключові слова: глутатіон, дріжджі, Hansenula polymorpha, метаболічна інженерія.

Повний текст (PDF)

Література:
1. Penninckx M.J. A short review on the role of glutathione in the response of yeasts to nutritional, environmental, and oxidative stresses // Enzyme Microb Technol. — 2000. — 26. — P. 737—742.
2. Pocsi I., Prade R., Penninckx M. Glutathione, Altruistic Metabolite in Fungi // Advances in Microbial Physiology. — 2004. — V. 49. — P.13—86.
3. Li Y., Wei G., Chen J. Glutatione: a review on biotechnological production // Applied Microbiology and Bio technology. — 2004. — P. 305—315.
4. Gellisen G. Hansenula polymorpha — biology and applications. — Weinheim: Wiley VCH; 2002.
5. Ubiyvovk V.M., Ananin V.M., Malyshev A.Y. et al. Оptimization of glutathione production in batch and fedbatch cultures by the wild-type and recombinant strains of the methylotrophic yeast Hansenula polymorpha DL-1 // BMC Biotechnol. — 2011. — V. 11. — P. 8.
6. Sambrook J., Fritsh E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory // Cold Spring Harbor, New York. — 1989.
7. Faber K.N., Haima P., Harder W. et al. Highly-efficient electrotransformation of the yeast Hansenula polymorpha. Curr Genet. — 1994. — 25. — P. 305—310.
8. Griffith O., Mulcahy R. The enzyme of glutathione synthesis: γ-glutamylcysteine synthetase //Advances in enzymology and related aress of molecular biology. — 1999. — V.73. — P. 209—267.
9. Grabek-Lejko D, Kurylenko O.O, Sibirny V.A. et al. Alcoholic fermentation by wild-type Hansenula polymorpha and Saccharomyces cerevisiae versus recombinant strains with an elevated level of intracellular glutathione // J. Ind. Microbiol Biotechnol. — 2011. — 38(11). 1853—9.
10. Taxis C., Knop M. System of centromeric, episomal, and integrative vectors based on drug resistance markers for Saccharomyces cerevisiae. BioTechniques. — 2006. — 40. — P. 73—78.
11. Wang Z., Tan T., Song J. Effect of amino acids addition and feedback control strategies on the high-cell-density cultivation of Saccharomyces cerevisiae for glutathione production // Process Biochemistry. — 2007. — 42. — P. 108—111.